Pós-graduação em Biologia da Morte Celular I
Apresentação
Seminários
Cecília M. P. Rodrigues, FFUL
Lorenzo Galluzzi, INSERM, Villejuif, France
Sessão 1
Avaliação de alterações apoptóticas em
organitos celulares isolados
Fraccionamento celular e purificação de
mitocôndrias
Ensaios de permeabilidade membranar
Identificação e localização subcelular de
factores apoptogénicos por Western blot
Sessão 2
Indução e execução de apoptose em
células intactas – Parte I
Isolamento e cultura primária de células;
subcultura de linhas celulares
Ensaios de viabilidade celular
Avaliação morfológica e imunocitoquímica
da apoptose
Microscopia de fluorescência e
processamento digital de
imagem
Sessão 3
Indução e execução de apoptose em células
intactas – Parte II
Extracção de proteínas citosólicas e totais
de células em cultura
Estudo da activação de caspases e da
degradação de substratos endógenos por
Western blot
Sessão 4
Indução e execução de apoptose em células
intactas – Parte III
Estudo da actividade das caspases por
degradação de substratos exógenos e
espectrofotometria
Sessão 5
Pesquisa de morte celular em tecidos
Detecção e quantificação da apoptose pelo
ensaio de TUNEL
Seminário
Apresentação e discussão de resultados
Conclusões finais